Elektroforeza jest techniką laboratoryjną wykonywaną w celu rozdzielenia cząsteczek według ich wielkości i ładunku elektrycznego, aby można było postawić diagnozę chorób, zweryfikować ekspresję białek lub zidentyfikować mikroorganizmy.
Elektroforeza to prosta i tania procedura stosowana w rutynowych pracach laboratoryjnych i projektach badawczych. W zależności od celu elektroforezy może być konieczne przeprowadzenie innych testów i badań, na przykład w celu postawienia diagnozy.
Po co to jest
Elektroforeza może mieć kilka zastosowań, zarówno w projektach badawczych, jak i diagnostycznych, ponieważ jest to prosta i tania technika. Zatem elektroforezę można przeprowadzić w celu:
- Identyfikuj wirusy, grzyby, bakterie i pasożyty, przy czym ta aplikacja jest częściej stosowana w projektach badawczych;
- Test na ojcostwo;
- Sprawdź ekspresję białek;
- Zidentyfikuj mutacje, przydatne np. W diagnostyce białaczek;
- Analiza rodzajów krążącej hemoglobiny, przydatna w diagnostyce anemii sierpowatej;
- Oceń ilość białek obecnych we krwi.
W zależności od celu elektroforezy może być konieczne wykonanie innych badań uzupełniających, aby lekarz mógł uzupełnić diagnozę.
Jak to się robi
Do przeprowadzenia elektroforezy niezbędny jest żel, którym w zależności od celu może być poliakrylamid lub agaroza, bufor do elektroforezy i kadzi, marker masy cząsteczkowej i barwnik fluorescencyjny, a także sprzęt do oświetlania UV lub LED, znany również jako transiluminator.
Po przygotowaniu żelu należy położyć określony przedmiot, aby wykonać zagłębienia w żelu, popularnie zwane grzebieniem, i pozwolić żelowi zastygnąć. Gdy żel będzie gotowy, wystarczy nałożyć substancje na dołki. W tym celu w jednym z dołków należy umieścić marker masy cząsteczkowej, kontrolę pozytywną, czyli substancję, o której wiadomo, co to jest, kontrolę negatywną, która gwarantuje prawidłowość reakcji oraz próbki do analizy. Wszystkie próbki należy zmieszać z barwnikiem fluorescencyjnym, ponieważ w ten sposób można zwizualizować prążki na transiluminatorze.
Żel z próbkami należy umieścić w kadzi do elektroforezy, w której znajduje się określony roztwór buforowy, a następnie włączyć urządzenie tak, aby pojawił się prąd elektryczny, a co za tym idzie, różnica potencjałów, co jest ważne dla separacji cząstek zgodnie z do ich obciążenia i rozmiaru. Czas przebiegu elektroforetycznego zmienia się w zależności od celu zabiegu i może trwać do 1 godziny.
Po ustalonym czasie można obejrzeć wynik przebiegu elektroforetycznego przez transiluminator. Po umieszczeniu żelu w świetle UV lub LED można zwizualizować wzór pasma: im większa cząsteczka, tym mniej migruje, zbliżając się do studni, podczas gdy im lżejsza cząsteczka, tym większy potencjał migracyjny.
W celu walidacji reakcji konieczne jest uwidocznienie prążków kontroli pozytywnej, a w kontroli negatywnej nic nie jest wizualizowane, w przeciwnym razie wskazuje to na zanieczyszczenie i cały proces należy powtórzyć.
Rodzaje elektroforezy
Elektroforezę można przeprowadzić w różnych celach i zgodnie z jej przeznaczeniem można zastosować kilka rodzajów żelu, z których najpowszechniejszy jest poliakrylamid i agaroza.
Elektroforeza do identyfikacji mikroorganizmów jest częściej wykonywana w laboratoriach badawczych, jednak w celach diagnostycznych elektroforeza może służyć do identyfikacji chorób hematologicznych i chorób, które ewoluują wraz ze wzrostem ilości białek, będących głównymi rodzajami elektroforezy:
1. Elektroforeza hemoglobiny
Elektroforeza hemoglobiny jest techniką laboratoryjną wykonywaną w celu identyfikacji różnych typów hemoglobiny krążącej we krwi, umożliwiając identyfikację obecności chorób związanych z syntezą hemoglobiny. Rodzaj hemoglobiny jest identyfikowany za pomocą elektroforezy przy określonym pH, najlepiej między 8,0 a 9,0, przy czym wzór pasm jest weryfikowany, który można porównać do wzoru normalnego, co pozwala na identyfikację obecności nieprawidłowych hemoglobin.
Do czego służy: Elektroforeza hemoglobiny jest wykonywana w celu zbadania i zdiagnozowania chorób związanych z syntezą hemoglobiny, takich jak anemia sierpowata i choroba hemoglobiny C, a ponadto jest przydatna w różnicowaniu talasemii. Dowiedz się, jak interpretować elektroforezę hemoglobiny.
2. Elektroforeza białek
Elektroforeza białek to badanie zlecane przez lekarza w celu oceny ilości białek krążących we krwi, a tym samym identyfikacji chorób. Test ten jest wykonywany z próbki krwi, która jest odwirowywana w celu uzyskania osocza, części krwi, na którą składają się między innymi białka.
Po elektroforezie można zwizualizować wzór prążków, a następnie wykres, na którym wskazana jest ilość każdej frakcji białek, który ma podstawowe znaczenie dla diagnozy.
W jakim celu się to robi: Elektroforeza białek pozwala lekarzowi na zbadanie występowania szpiczaka mnogiego, odwodnienia, marskości wątroby, zapalenia, choroby wątroby, zapalenia trzustki, tocznia i nadciśnienia tętniczego zgodnie ze wzorem prążków i wykresem przedstawionym w raporcie z badania.
Dowiedz się, jak to się robi i jak zrozumieć wynik elektroforezy białek.
Czy ta informacja była pomocna?
tak nie
Twoja opinia jest ważna! Napisz tutaj, jak możemy ulepszyć nasz tekst:
Jakieś pytania? Kliknij tutaj, aby otrzymać odpowiedź.
Email, na który chcesz otrzymać odpowiedź:
Sprawdź wiadomość e-mail z potwierdzeniem, którą Ci wysłaliśmy.
Twoje imię:
Powód wizyty:
--- Wybierz powód --- ChorobaŻyj lepiejPomóż innej osobie Zdobądź wiedzę
Czy jesteś pracownikiem służby zdrowia?
NieLekarzFarmaceutycznyPielęgniarkaNutrycjonistaBiomedycznyFizjoterapeutaPielęgniarkaInne
Bibliografia
- ENCYKLOPEDIA BIOSFERA, CENTRUM NAUKOWE POZNAWANIA. Elektroforeza: koncepcje i zastosowania. 2015. Dostępne pod adresem :. Dostęp 24 września 2019
- KASVI. Co to jest elektroforeza i dlaczego jest ważna?. Dostępne w: . Dostęp 24 września 2019 r
